干貨分享丨線(xiàn)性不佳？酰胺醇類(lèi)獸藥檢測關(guān)鍵點(diǎn)大揭密

酰胺醇類(lèi)藥物又稱(chēng)氯霉素類(lèi)抗生素，屬于廣譜抗生素，常見(jiàn)的該類(lèi)藥物主要包括氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考等。農業(yè)農村部公告第250號已明確將氯霉素列入《食品動(dòng)物中禁止使用的藥品及其他化合物清單》。甲砜霉素為氯霉素類(lèi)衍生物，而氟苯尼考是新一代氯霉素類(lèi)抗生素，氟苯尼考胺是其主要代謝產(chǎn)物。根據《GB 31658.20-2022》，除氯霉素的內標選擇是氯霉素-D₅外，其它3種均是采用的都是其-D₃的內標物。

從以上化學(xué)式可以看到，該類(lèi)物質(zhì)都含有一個(gè)或兩個(gè)氯元素，而氯元素非常顯著(zhù)的特點(diǎn)則是有Cl³⁵和Cl³⁷的同位素。

我們以氟苯尼考為例，上圖和下圖分別為氟苯尼考標樣和氟苯尼考D₃內標的質(zhì)譜圖，可以看到，氟苯尼考除了在m/z 356和m/z 358處有較高響應外，在m/z 359處也有一定響應，而m/z 359正是氟苯尼考-D3的母離子。那么，氟苯尼考在m/z 359的響應是否會(huì )對內標物氟苯尼考-D3的響應造成干擾，從而導致了這一問(wèn)題的產(chǎn)生？

為此，我們設計了一個(gè)小實(shí)驗。只進(jìn)標樣溶液（不含內標），我們看到其在內標通道也是有響應的，以下是10 ng/mL氟苯尼考的色譜圖，氟苯尼考在定量通道上的峰面積是3457270，而在內標通道上的峰面積達到296836，占比8.6%。這樣也就不難理解隨著(zhù)目標物濃度的不斷提高，內標的響應也會(huì )隨之增大了，這樣的情況下，內標法得到的線(xiàn)性曲線(xiàn)當然不佳了。

如何解決這些含氯化合物-D3同位素內標因目標組分帶來(lái)的響應干擾問(wèn)題？比較簡(jiǎn)單的方法是避開(kāi)受到干擾的離子而選擇其它離子作為母離子，如氟苯尼考-D3，選擇m/z 361作為母離子，因為氟苯尼考對m/z 361離子的貢獻更小。下表為化合物新選擇的離子對信息。

改變成新的離子對信息后，甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺的線(xiàn)性改善非常明顯，這樣內標法的線(xiàn)性不佳問(wèn)題就妥妥的解決啦！

看了本期的難點(diǎn)項目經(jīng)驗分享，相信大家都有所了解，如果分析的化合物中含有氯或溴元素時(shí)，可要小心了，經(jīng)?？赡艹霈F因為內標離子通道選擇的不合適，造成目標物的同位素峰與內標物的質(zhì)量數發(fā)生重疊的問(wèn)題，從而影響到線(xiàn)性乃至定量有偏差。因此在分析這類(lèi)化合物時(shí)，尤其是化學(xué)式中含有不止一個(gè)氯或溴元素的物質(zhì)時(shí)，建議大家可以盡量購買(mǎi)含氘代、13C或¹⁵N個(gè)數比較多的同位素內標，另一方面，當化合物在內標的通道有干擾時(shí)，我們也可以選擇[M-H+2]^-作為內標的母離子而不是基峰[M-H]^-。

島津應用云后續還將發(fā)布獸藥分析大講堂系列，根據獸藥檢測技術(shù)的難點(diǎn)項目，陸續發(fā)布檢測關(guān)鍵點(diǎn)小貼士及解決方案，幫助大家共克食品安全難關(guān)。